光學(xué)顯微鏡作為一種對物體進行放大觀察的精密儀器,不同的光學(xué)顯微鏡可觀察不同種類的樣品,作微生物研究,植物研究,動物研究等行業(yè)的用戶需要看到細菌大小的級別,那么在觀察此類樣品的時候應(yīng)該選用什么樣的顯微鏡,本文詳細分析 。
回答這個問題可以從細菌的菌體大小、人眼及顯微鏡的分辨率等方面來討論。
1、細菌的菌體大小一般是微米級別的,以大腸桿菌為例:長度約為1um,寬度約為0.5um。
2、分辨率是指能被清晰區(qū)分的兩個物點的zui小間距。
顯微鏡的分辨率是指顯微鏡放大成像后,所能清晰區(qū)分的兩個物點的zui小間距。
儀器的分辨率是指儀器提供被測對像微細結(jié)構(gòu)信息的能力。分辨率越高則提供的信息越細致。超出放大極限的放大倍數(shù)被稱為無效放大,無效放大不能夠提供更多的細微結(jié)構(gòu)的信息。
3、人眼的分辨率是0.1mm,即在光線充足、距離為1英尺的條件下,一般人眼能分辨的兩點間zui小距離為0.1mm。
4、綜上所述:要想看到細菌的存在,則放大倍數(shù)至少要有:0.1mm ÷ 0.5um = 1000 ÷ 5 =200 倍。不過 在此放大倍率下,看到的細菌(大腸桿菌)只是一個小點,要想看清其更加細微的結(jié)構(gòu)信息,必須提高顯微鏡的放大倍率。
5、普通光學(xué)顯微鏡的 分辨率受可見光波長的限制(390~770nm,),一般不會超過1000倍,這是普通光學(xué)顯微鏡的放大極值。超過1000倍的放大無法提供更細微的結(jié)構(gòu)信息,屬于無效放大的范圍。
6、電子顯微鏡的放大倍數(shù)可以達到80萬倍,其基本原理與普通光學(xué)顯微鏡相同,是通過高壓產(chǎn)生了短波長的電子波。
放大400倍(10x、40x)就可以勉強看見細菌了,不過只有針尖大小,就像是一個個小點。一般我們還是放大到1000倍(10x、100x)觀察,這個時候細菌的外型還是看得挺清楚的,經(jīng)過特殊染色鞭毛也能看清楚。放大1000倍就要用油鏡了。所謂油鏡,就是在物鏡鏡頭和蓋玻片中間滴一滴香柏油,香柏油的光線折射率比空氣要高,這樣才可以使用更大的放大倍數(shù)。
10x、40x表明這個鏡頭放大10倍、40倍。目鏡的放大倍數(shù)與物鏡的放大倍數(shù)相乘就得出這個顯微鏡總的放大倍數(shù)。中學(xué)用的顯微鏡的目鏡、物鏡都是可以換的,目鏡一般是5x、10x。一點的顯微鏡的目鏡一般都只有10x,看過大腸桿菌(E.coli)、金黃色葡萄球菌、枯草芽胞桿菌、巨大芽胞桿菌(用來看芽胞的)。