顯微鏡在核孔復(fù)合組織提出了新的見解:核孔復(fù)合物 (NPC)在核膜一個(gè)大的蛋白質(zhì)復(fù)合物,表示其柵極連接到所述真核基因構(gòu)成。 這種復(fù)雜的由幾百形成為注定要進(jìn)入或離開核化合物的選擇性柵極蛋白質(zhì)。
正因?yàn)槿绱顺錾墓δ躈PC的結(jié)構(gòu)是很大的興趣。 到目前為止,全國(guó)人大結(jié)構(gòu)分析已主要限于結(jié)晶研究或電子顯微鏡。 單組分的幾種結(jié)構(gòu)已經(jīng)被破譯通過晶體學(xué)。 然而,復(fù)雜的內(nèi)各個(gè)蛋白質(zhì)的組織仍然難以捉摸。 一個(gè)間隙現(xiàn)已關(guān)閉通過使用超分辨率顯微鏡。
揚(yáng)Ellenberg和他的科學(xué)家團(tuán)隊(duì)在EMBL海德堡已經(jīng)獲得了新的見解的NPC結(jié)構(gòu)的顯微鏡基態(tài)損耗(GSD)的幫助。
安娜·辛波絲卡*近公布的這項(xiàng)研究的科學(xué)文章中的結(jié)果“核孔支架結(jié)構(gòu)由超分辨率顯微鏡和粒子平均分析”和她的成就的意見和基態(tài)損耗顯微鏡的蛋白復(fù)合物的分析在隨后的采訪中的潛力。
GSDIM方法的研究?jī)?yōu)勢(shì)有哪些?
在我們的研究中,我們?cè)噲D了解大型多蛋白復(fù)合物,如核孔復(fù)合物(NPC),都建立。 因?yàn)樗鼈兊某叽绾蛷?fù)雜性,例如分子機(jī)器都超出了單個(gè)方法的范圍和長(zhǎng)期以來一直用于結(jié)構(gòu)生物學(xué)的一個(gè)挑戰(zhàn)。 原子分辨率的方法,例如X射線晶體學(xué)或核磁共振需要純化的樣品,并且不適合于非常大的集。 雖然,電子顯微鏡可以觀察大復(fù)合體在其天然環(huán)境中的細(xì)胞,它往往是很困難的分配的電子密度,以個(gè)別蛋白質(zhì)。 在熒光顯微鏡中的蛋白質(zhì)的身份是已知的,超分辨率(SR)現(xiàn)在讓我們來可視化低于衍射JI限的細(xì)節(jié)。 當(dāng)SR被結(jié)合的顆粒平均,蛋白'位置可以被映射到一個(gè)亞納米精度,一個(gè)尺度,使得適用于大型復(fù)合結(jié)構(gòu)的研究光鏡。 因此SR顯微鏡可以連接不同類型的數(shù)據(jù),*終幫助生成的多蛋白組件偽原子模型。 此外,特別是GSDIM等本地化SR方法的一大優(yōu)勢(shì)是,他們使用比較簡(jiǎn)單,并定期讓蛋白,是10-20納米相隔的分辨率。 這對(duì)我們來說很重要,因?yàn)槲覀兡軌颢@得大的數(shù)據(jù)集,并期待在許多不同的標(biāo)記在一個(gè)相對(duì)有效的方式。